Determinación de NOX-2 y NOX-4 en miocardio de ratas, analizando su relación con la cardiopatía diabética

Abstract

La diabetes corresponde a una patología altamente prevalente tanto a nivel nacional como internacional. Dentro de sus complicaciones encontramos la cardiopatía diabética, siendo una de las mayores causas de mortalidad de la enfermedad. Esta complicación se relaciona con la mayor producción de especies reactivas del oxígeno (ROS), lo cual se encuentra modulado por el complejo NAPDH oxidasa, por la respiración mitocondrial y por la Angiotensina II. Estos modulares provocan una regulación positiva de las ROS. La familia de las NAPDH oxidasas, ahora denominadas NOXs comprenden variadas isoformas, donde podemos destacar NOX-2 y NOX-4, a nivel cardiaco.En este estudio se llevó a cabo la pesquisa de NOX-2 y NOX-4 determinando su expresión génica a través del ARNm, estudiado en un modelo de diabetes; ratas control (C), ratas diabéticas (inducido por aloxano) sin ejercicio físico (S) y ratas diabéticas (inducido por aloxano) sometidas a ejercicio físico (E). El ARNm fue extraído del tejido cardiaco con el método del TRIZOL. Luego de ello se realizó la transcripción del ARNm a ADNc, para finalmente continuar con la cuantificación del transcrito por medio de la PCR-real time. Finalmente, los resultados obtenidos (CTs) nos permitieron analizar los datos comparando la producción de ARNm entre los distintos grupos estudiados,pudiendo concluirse, que el ejercicio físico no disminuía la producción de ARNm para NOX hallándose aumentada tanto NOX-2 como NOX-4, en comparación a las ratas diabéticas sedentarias y las ratas control. Palabras claves: NOX-2,NOX-4 , NAPDH, PCR-real time, Cardiopatía Diabética, / ABSTRACT: Diabetes corresponds to a highly prevalent pathology both nationally and internationally. Among its complications diabetic cardiomyopathy is one of the main causes of mortality of the disease. This complication is associated with increased production of reactive oxygen species (ROS), which is modulated by the NADPH oxidase complex, mitochondrial respiration and Angiotensin II. These cause upregulation of ROS. The family of NADPH oxidases, now called NOXs, comprises various isoforms, where NOX-2 and NOX-4 are the most important in the heart. In this study we conducted the investigation of NOX-2 and NOX-4 determining gene expression through mRNA, studied in a model of diabetes; control rats (C),diabetic rats (induced by alloxan) without exercise (S) and diabetic rats (induced by alloxan) subjected to physical exercise (E). mRNA was extracted from the cardiac tissue with the Trizol method. After the mRNA isolation, the transcription to cDNA was performed. Finally the amount of NOXs transcript was quantified by real-time PCR.The results obtained (CTs) allowed us to analyze the data comparing mRNA production between the different groups studied. It can be concluded that exercise did not decrease the production of mRNA for NOX. On the contrary, it is associated with an increase in both NOX-2 and NOX-4 mRNA in exercised rats compared to sedentary diabetic rats and control rats. Keywords: NOX-2, NOX-4, NAPDH, PCR-real time, Diabetic cardiopathy, Diabetes.