Estandarizacion de reverse transcription polymerase chain reaction, para el estudio de expresión genetica del factor de necrosis tumoral alfa y adioponectina en tejido adiposo de ratones con sindrome metabolico-like

Abstract

Introducción: En el síndrome metabólico (SM) coexisten varios factores de riesgo, cuya presencia constituye un riesgo potencial y progresivo para el desarrollo de patologías cardiovasculares. En estas alteraciones, el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y la adiponectina juegan un rol importante. Estudiar la expresión de estas moléculas, a través de la expresión de sus genes (mRNA), se ha convertido en una buena estrategia de investigación. Objetivo general: Estandarizar la metodología Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR), para medir la expresión génica de TNF-α y adiponectina en tejido adiposo de ratón con y sin SM- like. Material y método: La muestra utilizada (n:14) correspondió a tejido adiposo blanco(TAB) proveniente de ratones CF-1 machos. Las muestras fueron extraídas de ratones alimentados con una dieta normal (ratones sin SM-like, n:7) y ratones alimentados con una dieta hipergrasa (con SM-like, n:7), en un experimento previo. Se empleó RT-PCR como método de estudio de la expresión génica de TNF-α y adiponectina en tejido adiposo de los ratones anteriormente mencionados. Resultados: Se logró extraer exitosamente RNA a partir de TAB de ratón, así como una satisfactoria detección y resolución de las bandas para TNF-α y adiponectina, incluyendo la detección del gen de expresión constante GAPDH. Conclusiones: La RT-PCR es una herramienta útil para el estudio de la expresión génica de citoquinas, como TNF-α y adiponectina a partir de TAB de ratón