Estudio histologico de diferenciacion in vitro de orquidea chilena del genero Chloraea

Abstract

Se estudió, mediante cortes histológicos, el desarrollo in vitro de plántulas de orquídea nativa del género Chloraea. Este material fue previamente clasificado en laboratorio de acuerdo a caracteres morfológicos. Se determinaron siete estados. El estado 0 se asignó a la semilla seca; estado 1 a la semilla in vitro con las primeras divisiones; estados 2 protocormo (embrión no diferenciado); estado 3 protocormo más desarrollado con numerosas divisiones; estado 4 con dos extremos, apical aguzado y basal ancho, con apariencia de botella; estado 5 desarrollo abundante de pelos en la zona basal; estado 6 desarrollo de clorofila en el extremo apical, aumento en grosor de la zona basal; estado 7 extremo apical bifurcado por desarrollo de hojas, raíz lateral inhibida. El material se fijó en FAA e incluyó en parafina. Se hicieron cortes de 16 micrones en micrótomo manual, los cuales se tiñeron con hematoxilina, safranina y fast green. El contenido de almidón se detectó con ioduro de potasio. Los cortes se montaron en Entellan y se tomaron fotografías al microscopio óptico. Se observó que en la semilla seca aparecen dos regiones, una meristemática y otra parenquimática. En el estado 4 la región meristemática origina primordios foliares; y en el centro del protocormo se originan las células procambiales, de las cuales surge el xilema de tipo helicoidal que se observó en el estado cinco. La zona del parénquima asume una función de reserva de almidón. En la etapa 7, se observó que la aparición de la raíz lateral surge a partir del meristema caulinar, en la zona en que se diferencian los cordones de xilema bajo el meristema apical del tallo. Este estudio no sólo permitió establecer relaciones entre las características morfológicas externas y la estructura interna en las primeras etapas del desarrollo in vitro de Chloraea sp, sino también observar que la formación del eje caulinar ocurre previo a la formación del eje radicular. La zona en que debía existir un polo radicular corresponde a un tejido parenquimático almacenador, que aporta la energía necesaria para el proceso de diferenciación de raíces. Esto indica que en el proceso de embriogénesis cigótica no están simultáneamente presentes ambos meristemas, como ocurre en otras monocotiledóneas (gramíneas)